Agarósa dufter lífrænt efni með efnaformúlu c24h38o19. Það er hvít eða gul perla eins og gel ögn eða duft, sem er línuleg fjölliða, og grunnbyggingin er 1,3 tengdur - D-galaktósi og 1,4-tengdur 3,6-endóeter-l-galaktósi eru tengdir til skiptis.
Agar pektín er misleit blanda sem samanstendur af mörgum smærri sameindum. Agarósa er almennt hituð í yfir 90 gráður til að leysast upp í vatni og þegar hitastigið fer niður í 35-40 gráður myndar það gott hálffast hlaup, sem er aðaleiginleikinn og grundvöllurinn fyrir mismunandi notkun þess. Árangur agarósa hlaups kemur venjulega fram með styrk hlaupsins. Því hærra sem styrkurinn er, því betri árangur hlaupsins.
Agarósa duft, skammstafað sem Ag, er óhlaðinn hlutlaus hluti af agar, einnig þýtt sem agarósa eða agarósa. Efnafræðileg uppbygging agarósa er tengd með 1,3 - D-galaktósa og 1,4-tengdum 3,6-endóeter-l-galaktósa eru tengdir til skiptis.
Agarósa er unnin úr fjölsykru rauðþörunga og er aðalþáttur hans fjölgalaktósi, þar af um 70% agarósi og 30% greinóttur agarósa. Agarósa hefur línulega uppbyggingu og fer framhjá D-galaktósa og 3,6-þurrkuðum galaktósa - 1, 4 og - 1, 3 mótum mynda til skiptis endurteknar tvísykrueiningar. Greinótt keðja agarósa var dregin út úr - 1, 3 tengi skilja aðra keðju að. Efnið sem unnið er úr þangi með heitu vatni inniheldur um 40% agar. Agar sem fæst í verslun (almennt þekktur sem agar) er oft í laki eða lausu reipiformi og er venjulega notað sem ætilegt gúmmí, lyfjaumbúðir eða bakteríuræktunarmiðill. Hreint agarósi er oft notað í lífefnafræðilegum rannsóknarstofum sem hálffastur stuðningur í rafdrætti, litskiljun og annarri tækni við aðskilnað og greiningu á líffræðilegum stórsameindum eða litlum sameindum.
Agarósa framleiðsluferli má skipta í fjóra hluta: formeðferð, útdrátt, DEAE sellulósa meðferð og þurrkun
1) Formeðhöndluð duftkennd hráefni eru þurrkuð beint við 80C í 1/2 klst. strimlan og blokkarhráefnið er þvegið með vatni, skorið í litla bita og bakað inn
2) Útdráttur: eftir að hafa hrært og útdráttur með ediksýru natríum asetat blönduðu ester lausn í nokkrar klukkustundir, fjarlægðu vatn með sogi, þvoðu, hrærðu síðan og dragðu út með natríumkarbónat natríum bíkarbónat jafnalausn í nokkrar klukkustundir, og dældu síðan, síaðu og þvoðu með vatni
3) Agarhlaupið sem dregið er út með jafnalausninni er leyst upp í 4% lausn með því að hita með vatni og síðan bætt við DEAE sellulósa til að hræra í í 3-4 klst undir hita varðveislu, og síðan skilið í skilvindu. Síuvökvanum er safnað saman og síað til að fá hvíta lausn í kvoðuástandi
4) Afvötnun: eftir að hvíta síuvökvinn hefur verið hituð, bætið við 95% etanóli hratt á meðan hrært er þar til engin augljós útfelling er, kælið það niður í stofuhita, hellið efri lagslausninni út, þvoið og þurrkið botnfallið til að fá vöruna, með afrakstur upp á 71%
Endurheimt hvarfefnis DEAE sellulósa endurheimt: eftir skilvindu er botnfallið soðið með vatni, síað á 100 möskva silkiklút, endurtekið nokkrum sinnum þar til síuvökvinn er tær, síðan þveginn með 0,5mól/1 HCI, 0,5mól/1 NaOH og vatni og þurrkaður. Endurheimtingarhlutfallið er 95%. 80 C hlutanum var safnað með beinni eimingu á etanólískri vatnslausn sem er endurheimt úr Yichun vatnslausn. Síðan er föstu natríumklóríði bætt við til mettunar og hægt að halda áfram að eima . 70% er hægt að hlaða. Eftir að natríumklóríð í flöskunni er gufað upp er einnig hægt að hlaða það með loki.
Agarósa dufter fjölsykra unnin úr þangi og er aðalþáttur agar. Frá því að það uppgötvaðist hefur það verið mikið notað á mörgum sviðum vegna einstakra eðlis- og efnafræðilegra eiginleika þess, svo sem hlaupmyndunargetu, hitastöðugleika, efnafræðilegan stöðugleika og lífsamrýmanleika. Eftirfarandi er ítarleg útskýring á tilgangi þess:
Agarósa hlaup rafskaut er ein algengasta aðskilnaðar- og greiningaraðferðin í sameindalíffræði. Sem miðill hlaup rafdráttar hefur agarósa kosti stóra svitaholastærð, breitt aðskilnaðarsvið og einfalda aðgerð. Í rafskautsferlinu flytja líffræðilegar stórsameindir eins og DNA, RNA eða prótein í gegnum svitaholur agarósagelsins undir áhrifum rafsviðs. Vegna mismunar á hleðslu, stærð og lögun mismunandi sameinda er flutningshraði þeirra í hlaupi mismunandi, þannig að aðskilnaður er náð. Agarósa hlaup rafskaut er mikið notað við klónun gena, greiningu á genatjáningu og uppgötvun genastökkbreytinga. Það er almennt notað sem stuðningur eða fylki í frumurækt. Vegna framúrskarandi lífsamrýmanleika og efnafræðilegs stöðugleika getur agarósa veitt frumum stöðugt vaxtarumhverfi. Til dæmis, í mjúka agar nýlendumyndunartilrauninni, er agarósi notaður til að búa til hálf-fastan ræktunarmiðil til að greina nýlendumyndunargetu frumna, sem hefur mikla þýðingu til að meta hversu illkynja umbreytingu frumna er.
Að auki er einnig hægt að sameina agarósa við önnur lífefni til að búa til samsett vinnupallaefni til notkunar í vefjaverkfræði og endurnýjunarlækningum. Agarósa hlaup gegnir einnig mikilvægu hlutverki í ónæmisdreifingu og ónæmisrafmagni. Í þessari tækni getur agarósagel, sem miðill mótefnavaka og mótefnaviðbragða, myndað skýrar útfellingarlínur eða hringi, sem hægt er að nota til að greina og greina nærveru og styrk mótefnavaka eða mótefna. Svitaholastærð og hleðslueiginleiki agarósagel getur haft áhrif á dreifingarhraða og bindingarvirkni mótefnavaka og mótefna, þannig að hægt er að fínstilla tilraunaaðstæður með því að stilla styrk og gerð agarósa.
Umsókn í sameindalíffræðitilraunum
Agarósa hlaup rafskaut er ekki aðeins hægt að nota til að aðskilja DNA og RNA, heldur einnig hægt að sameina það með annarri tækni til að ná hreinsun þeirra. Til dæmis, í ferli DNA útdráttar, er hægt að nota agarósa hlaup rafskaut til að greina heilleika og hreinleika DNA, og síðan er hægt að aðskilja mark DNA hlutann frá hlaupinu með hlaupskurði og endurheimt. Þessi aðferð hefur kosti auðveldrar notkunar og mikils batahlutfalls. Í kjarnsýrublöndunartilraunum er hægt að nota agarósagel sem fastfasa stuðning til að festa DNA eða RNA rannsaka á hlaupinu og blanda síðan við merktu markkjarnsýruna. Með því að greina nærveru og styrk blendingarmerkja er hægt að ákvarða nærveru og styrk markkjarnasýra.
Svitaholastærð og hleðslueiginleiki agarósagelsins getur haft áhrif á bindingarvirkni rannsakans og markkjarnasýra, þannig að hægt er að fínstilla blendingarskilyrðin með því að stilla styrk og gerð agarósa. Pólýmerasa keðjuverkun (PCR) er ein algengasta aðferðin í sameindalíffræði til að magna DNA. Við greiningu á PCR vörum er agarósa gel rafskaut ein algengasta aðferðin. Með því að aðskilja PCR afurðir með rafdrætti er hægt að greina stærð og hreinleika mögnuðu brotanna og ákvarða þannig hvort PCR hvarfið heppnist og hvort það séu ó-sértæk mögnunarvandamál.
Þó að svitaholastærð agarósa hlaups sé tiltölulega stór, hentar það ekki til að aðskilja lítil sameindaprótein, en samt er hægt að nota það til próteinaðskilnaðar og hreinsunar í sumum tilfellum. Til dæmis, við undirbúningshlaup rafdráttar, er hægt að nota agarósa hlaup til að aðskilja og hreinsa prótein með stærri mólmassa. Að auki er einnig hægt að sameina agarósa við önnur efni til að undirbúa samsett hlaup til að auka aðskilnaðarsvið þess og bæta skilvirkni skilvirkni. Í sumum tilraunum til að ákvarða ensímvirkni er hægt að nota agarósagel sem burðarefni til að festa ensím. Óhreyfanleiki ensímsins á agarósageli getur viðhaldið virkni og stöðugleika ensímsins og auðveldað aðskilnað og endurheimt ensímsins frá hvarfefnum. Þessi aðferð hefur víðtæka notkun á sviði ensímverkfræði.
Umsókn í örverufræði
Agarósa er almennt notað sem storkuefni í örveruræktunarmiðlum. Í samanburði við agar hefur agarósa meiri hreinleika og lægra óhreinindi, sem gerir það hentugra fyrir örveruræktun. Þegar fastur ræktunarmiðill er útbúinn, leysið upp agarósa í heitu vatni, bætið síðan við öðrum næringarefnum og sýklalyfjum og kælið til að mynda fastan ræktunarmiðil. Þessi tegund ræktunarmiðils getur veitt örverum stöðugt vaxtarumhverfi, auðveldað einangrun þeirra, hreinsun og auðkenningu. Í örverufræðilegum auðkenningartilraunum er hægt að nota agarósa hlaup til að útbúa tiltekna auðkenningarmiðla. Til dæmis, þegar greint er frá þarmabakteríum, er hægt að nota agarósa ræktunarmiðil sem inniheldur sérstakar sykur til að greina mismunandi gerðir baktería með því að fylgjast með gerjun þeirra á sykri. Að auki er einnig hægt að nota agarósa hlaup til að útbúa lífefnafræðilega hvarfefni fyrir örverur til að greina efnaskiptaeiginleika þeirra og ensímvirkni.
Agarósa dufter almennt hitað upp í yfir 90 gráður til að leysast upp í vatni og þegar hitastigið fer niður í 35-40 gráður myndar það gott hálffast hlaup, sem er aðaleiginleikinn og grundvöllurinn fyrir mismunandi notkun þess. Árangur agarósa hlaups kemur venjulega fram með styrk hlaupsins. Því hærra sem styrkurinn er, því betri árangur hlaupsins. Gel agarósa stafar af tilvist vetnistengi. Allir þættir sem geta eyðilagt vetnistengin geta leitt til eyðingar hlaups. Agarósa er vatnssækið og nánast algjörlega laust við hlaðna hópa. Það veldur sjaldan eðlisbreytingu og aðsog á viðkvæmar líffræðilegar stórsameindir. Það er tilvalið óvirkt burðarefni. Í framleiðsluferli agarósa er nauðsynlegt að fjarlægja agar pektín eins mikið og mögulegt er, annars gæti verið mjög lítið magn af súlfati og pýruvínsýru til að koma í stað jónandi hópsins í agarósa, sem mun valda rafósóma (EEO) og hafa áhrif á hreyfingu agna. Súlfatinnihald agarósa með góðum gæðum er tiltölulega lágt, venjulega undir 0,2%, og rafosmósa er tiltölulega lítið, venjulega undir 0,13. Þess vegna er agarósa svo dýr en agar.
Árið 1937 skildi Araki agarósa frá agar í fyrsta sinn, en það var ekki fyrr en 1961 sem hjertin uppgötvaði fyrst frábæra frammistöðu agarósa að hann vakti æ meiri athygli og hóf iðnaðarframleiðslu. Agarósi er mikið notaður í klínískum prófum, lífefnafræðilegri greiningu og aðskilnaði lífmakrósameinda.
Agarósaduft er grundvallaratriði í sameindalíffræði og líftækni, með fjölbreytt úrval af notkunum í hlauprafnámi, sækniskiljun, ónæmisdreifingu og ónæmisrafmæli. Einstakir eiginleikar þess, eins og auðveld í notkun, fjölhæfni, lítil eiturhrif og kostnaðar-hagkvæmni, gera það að ómissandi þætti í rannsóknarstofurannsóknum. Þrátt fyrir takmarkanir þess, eins og takmarkaða upplausn og stökkleika, hafa nýlegar framfarir í agarósageltækni, þar á meðal há-gelum, for-steyptum geljum og agarósa-örvökvatækjum aukið notagildi þess og bætt afköst þess. Þar sem vísindarannsóknir halda áfram að þróast mun agarósaduft án efa vera dýrmætt og nauðsynlegt hvarfefni í sameindalíffræði og líftækni verkfærasettinu.
maq per Qat: agarose duft cas 9012-36-6, birgja, framleiðendur, verksmiðja, heildsölu, kaupa, verð, magn, til sölu