Thiazolyl Blue CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. er einn af reyndustu framleiðendum og birgjum thiazolyl blue cas 298-93-1 í Kína. Velkomin í heildsölu hágæða thiazolyl blue cas 298-93-1 til sölu hér frá verksmiðju okkar. Góð þjónusta og sanngjarnt verð í boði.

Thiazolyl blár, betur þekktur sem MTT (3-(4,5-dímetýlþíasól-2-ýl)-2,5-dífenýltetrasólíumbrómíð), hefur heillandi tvískiptingu - það er bæði mikilvægt verkfæri í frumulíffræði og kameljónefnafræðileg einkenni. Þetta gula kristallaða duft verður fyrir óvæntri myndbreytingu í lifandi frumum: hvatbera redúktasar klýfa tetrazólíumhring hans, umbreyta því í óleysanlegt fjólublátt formazan botnfall - viðbrögð svo sjónrænt sláandi að það hefur orðið gulls ígildi til að mæla lífvænleika frumna. Samt fyrir utan rannsóknarbekkinn sýnir MTT dulspekilegri hegðun; Kristölluð uppbygging þess myndar sérkennileg „síldarbeins“ mynstur í smásjá, á meðan redoxeiginleikar þess gera það kleift að taka þátt í framandi ljósefnafræðilegum viðbrögðum þegar það verður fyrir ákveðnum bylgjulengdum ljóss. Merkilegt er að efnasambandið sýnir sjaldgæft fyrirbæri sem kallast "metachromasia" - sem birtist mismunandi litir eftir styrk og sameindaumhverfi - eiginleiki sem áður var nýttur af textílefnafræðingum til að búa til "snjöll" litarefni. Nýlegar rannsóknir hafa leitt í ljós óvænt hlutverk þess sem veikur hemill á tilteknum öndunarkeðjuensímum, sem gefa í skyn að þetta alls staðar nálæga prófunarhvarfefni gæti hafa haft lúmsk áhrif á efnaskiptaferlana sem vísindamenn nota það til að rannsaka. Þegar þær eru leystar upp í lífrænum leysum sýna MTT lausnir óvenjulega flúrljómunardeyfandi áhrif sem hafa undrað eðlisefnafræðinga, sem bendir til flókinna millisameindasamskipta sem bíða enn fullrar skýringar.

Thiazolyl Blue,Efnaheitið er 3-(4,5-dímetýl-2-þíasól)-2,5-dífenýltetrasólíumbrómíð, skammstafað sem MTT, sem er mikilvægt lífrænt efnasamband. Síðan Mosman greindi fyrst frá notkun MTT-litunar til að ákvarða frumuvöxt og lifun árið 1983, hefur MTT verið mikið notað á sviðum eins og lífvísindum, læknisfræðilegum rannsóknum og lyfjaþróun. Eftirfarandi er nákvæm útskýring á tilgangi þess:

Umsókn í frumulíffræðirannsóknum

 

MTT er ein af klassísku aðferðunum til að ákvarða frumufjölgun. Meðan á frumuræktun stendur geta dehýdrógenasar eins og súkkínat dehýdrógenasi í lifandi frumuhvatberum dregið úr utanaðkomandi MTT í óleysanlegt blátt fjólublátt kristallað formazan, sem sest í frumuna. Dauðar frumur skortir þessa afoxunargetu og mynda því ekki formazan. Með því að leysa formazan upp í frumum og mæla ljósgleypni þess við ákveðnar bylgjulengdir (eins og 490nm eða 562nm) með því að nota ensím-tengd ónæmissogandi próf (ELISA) lesanda, getur fjöldi lifandi frumna endurspeglað óbeint. Innan ákveðins fjölda frumna er magn MTT kristalla sem myndast í réttu hlutfalli við fjölda frumna, þannig að frumufjölgun er hægt að ákvarða út frá mældu gleypnigildi (OD gildi).

Umsókn í frumulíffræðirannsóknum

 

MTT er einnig hægt að nota til að ákvarða eiturhrif lyfja eða annarra meðferðaraðferða (svo sem geislunargeislunar) á ræktuðum frumum in vitro. Með því að bera saman OD gildi meðferðarhópsins og samanburðarhópsins er hægt að meta áhrif lyfja eða meðferðaraðferða á frumuvirkni. Því hærra sem OD gildið er, því sterkari frumuvirkni; Þvert á móti gefur það til kynna að því veikari sem frumuvirkni er eða því meiri eituráhrif á frumu. Þessi aðferð hefur víðtæka notkun í lyfjaskimun, eiturefnarannsóknum og öðrum sviðum. Þrátt fyrir að MTT sé aðallega notað til að mæla frumufjölgun og frumueiturhrif, í sumum tilfellum, er einnig hægt að nota það til að aðstoða við rannsókn á frumudreifingu. Meðan á frumudreifingu stendur breytist ensímvirknin inni í frumunni, sem getur haft áhrif á afoxunargetu MTT. Með því að bera saman muninn á OD-gildum milli apoptótískra frumna og eðlilegra fruma, er hægt að ákvarða tilvik frumu apoptosis fyrirfram. Hins vegar skal tekið fram að MTT er ekki sérhæfð aðferð til að greina frumudauða og þarf að greina niðurstöður hennar ítarlega í tengslum við aðrar aðferðir til að greina frumudauða.

Umsókn í lyfjaþróun

 

Í lyfjaþróunarferlinu er MTT-greining algengt -afkastamikill lyfjaskimunaraðferð. Með því að rækta prófunarlyfið með frumum og nota MTT próf til að mæla breytingar á frumuvirkni er hægt að skima hugsanlegar virkar lyfjasameindir fljótt. Þessi aðferð hefur þá kosti að vera auðveld notkun, áreiðanlegar niðurstöður og mikla afköst og hefur mikilvægt notkunargildi á fyrstu stigum lyfjaþróunar. MTT prófið er einnig hægt að nota til að rannsaka verkunarmáta lyfja. Með því að bera saman breytingar á frumuvirkni við mismunandi lyfjameðferðaraðstæður er hægt að ákvarða áhrif lyfja á ferli eins og frumufjölgun og frumudauða til bráðabirgða. Með því að sameina aðrar sameindalíffræðilegar aðferðir eins og Western blot og frumuflæðismælingu, er hægt að afhjúpa markmið og merkjaleiðir lyfja frekar. Í lyfjaöryggismati er hægt að nota MTT próf til að meta eituráhrif lyfja á frumur. Með því að mæla OD gildisbreytingar frumna eftir lyfjameðferð er hægt að ákvarða hvort lyfið hafi frumueiturhrif og styrk eiturverkana. Þetta hefur mikla þýðingu fyrir leiðbeiningar um forklínískar rannsóknir og klíníska notkun lyfja.

Notkun MTT á öðrum sviðum

 

Í ónæmisfræðilegum rannsóknum er hægt að nota MTT próf til að ákvarða útbreiðslugetu eitilfrumna. Með því að rækta eitilfrumur saman við mótefnavaka eða ónæmisörvandi efni og mæla breytingar á frumuvirkni með MTT prófi, er hægt að meta ónæmissvörunargetu eitilfrumna. Þessi aðferð hefur víðtæka notkun í þróun bóluefna, ónæmismeðferð og öðrum sviðum. Í krabbameinsrannsóknum er hægt að nota MTT próf til að ákvarða útbreiðsluvirkni og lyfjanæmi æxlisfrumna. Með því að bera saman breytingar á OD-gildum æxlisfrumna við mismunandi lyfjameðferðaraðstæður er hægt að skima lyfjasameindir með hamlandi áhrif á æxlisfrumur og meta -æxlishemjandi áhrif þeirra. Þetta hefur mikla þýðingu fyrir leiðbeiningar um klíníska meðferð æxla. Í rannsóknum á umhverfis eiturefnafræði er hægt að nota MTT próf til að meta eituráhrif umhverfismengunarefna á frumur. Með því að rækta frumur með mismunandi styrk mengunarefna og mæla breytingar á frumuvirkni með MTT prófi er hægt að ákvarða eiturhrif og verkunarmáta mengunarefna. Þetta hefur mikla þýðingu fyrir mat á vistfræðilegri áhættu umhverfismengunarefna og mótun umhverfisverndarstefnu. 

Tilraunaskref afþíasólýl bláraðferð:

1: Trypsín meltir logarithmic fasa frumur, skilvindur og safnar þeim eftir lokun til að búa til frumusviflausn og stillir styrk þess í 5-10 með frumufjölda × 104/ml. Fyrir byrjendur, það er nauðsynlegt að gera frumur ná 5-10 × 104/ml veit oft ekki hvar á að byrja. Ég er hér til að veita þér einfalda aðferð til að ákvarða fjölda frumna í upphafi.

Tökum 25cm2 sem almennt er notað til frumuræktunar sem dæmi:

1) Frumuþéttleiki er um 80%~90% (myndin hér að neðan sýnir áætlaða ástand frumna við 80%~90% þéttleika). Eftir meltingu og skilvindu skaltu fjarlægja flotið og bæta við 3 ml miðli til að blanda því saman.

2) Taktu nýtt 15 ml dauðhreinsað miðflóttaglas (fyrir næsta skref sáningar á 96-brunnu plötu) og fylltu það með um það bil 9 ml miðli

3) Taktu 1ml úr 3ml frumusviflausninni sem útbúin var í fyrsta skrefi, bættu því í efri rörið og teldu frumurnar eftir blöndun. Á þessum tíma er það yfirleitt 5-10 eða minna × 104/ml, sem jafngildir 5-10 frumum í hverri frumu í 4 frumum á frumutalningartöflunni (sjá myndina hér að neðan); Ef styrkurinn er ekki nægur skal bæta frumusviflausninni í samræmi við talningarniðurstöðu og hver dropi reiknaður sem 50ul.

4) Fjöldi frumna ætti að breyta í samræmi við mismunandi tilgang tilraunarinnar. Til dæmis, í almennri frumufjölgunartilraun, er hægt að nota 2000 frumur í hverri brunn (jafngildir þéttleika frumusviflausnar 2 × 104/ml), 5000 til 10000 frumur í hverri brunn (jafngildir þéttleika frumusviflausnar 5 × 104/ml). Að auki ætti einnig að ákvarða fjölda frumna í samræmi við eigin eiginleika þeirra, svo sem vaxtarhraða. Til dæmis getur þéttleiki frumna sem vaxa hraðar verið aðeins minni.

2. Eftir að frumudreifingin hefur verið útbúin, blandið henni varlega saman og bætið 100 ul í hvert gat, þannig að þéttleiki frumanna sem á að prófa sé 5000-10000/hol (kantholið er fyllt með dauðhreinsuðu PBS).

L Athugið: Vegna þess að frumurnar halda áfram að setjast eftir blöndun er nauðsynlegt að blanda ítrekað meðan á sáningu stendur, eins og að blanda einu sinni á sex holur, til að tryggja að frumuþéttleiki sáningar sé nákvæmlega sá sami á milli holanna, sem skiptir sköpum fyrir niðurstöður MTT.

3. Settu sáðfrumuræktunarplötuna inn í útungunarvélina til ræktunar þar til frumueinlagið er þakið botni holunnar (96 holu flatplata) og bætið lyfinu við með styrkleikahalla. Í grundvallaratriðum er hægt að bæta lyfinu við eftir að fruman er fest við vegginn, eða tvær klukkustundir, eða hálfan dag, en við bætum lyfinu oft við síðdegis daginn áður og morguninn eftir. Almennt eru 5-7 hallar, 100 ul á holu og 3-5 margar holur stilltar. Mælt er með því að stilla 6, annars er erfitt að endurspegla raunverulegar aðstæður. Hægt er að nota eftirfarandi mynd sem viðmiðunarskref fyrir 96 holu plötu.

L Fyrir skömmtun bæta sumir lyfjum beint í 96-brunn plötur í mismunandi magni til að mynda styrkleikahalla. En ég held að við ættum að reyna að blanda mismunandi styrk af lyfjum í EP túpunni, fjarlægja síðan ræktunarfljótandi vökvann af 96-brunn plötunni (sem hægt er að soga í burtu með losunarbyssu) og bæta við 100 ul af ræktunarefni sem inniheldur mismunandi styrk lyfja, sem getur tryggt nákvæmni lyfjastyrks. Að auki skal tekið fram að ef þessi aðferð er notuð, ekki sjúga alla 96-brunn plöturæktunarlausnina áður en lyfi er bætt við. Þú ættir að bæta við sýnum strax eftir að þú hefur sogað hluta þess til að forðast frumudauða vegna þurrkunar á 96-brunnu plötunni.

Ræktað með 4,5% CO2 við 37 gráður í 16-48 klukkustundir og fylgst með áhrifum lyfsins undir hvolfi smásjá. Eftirfarandi mynd sýnir dæmigerðan lyfjastigull af frumudrepandi áhrifum.

4. Bætið 10 ul MTT lausn (5mg/ml, þ.e. . 0.5% MTT) í hvern brunn og haltu áfram að rækta í 4 klst. Ef lyfið getur brugðist viðþíasólýl blárræktunarlausninni má farga eftir skilvindu og bæta ræktunarlausninni sem inniheldur MTT eftir að hún hefur verið þvegin með PBS í 2-3 sinnum.

5. Stöðvaðu ræktunina og búðu þig undir upplausn og kristöllun.

Thiazolyl Blue, sem heitir Methyl Blue í kínversku, er mikilvægt lífrænt efnasamband sem er mikið notað í læknisfræði, líffræði og efnafræði. í læknisfræði er það oft notað til að meðhöndla nítríteitrun, blásýrueitrun osfrv., og er einnig notað við greiningu og viðbótarmeðferð sumra sjúkdóma; Í líffræðilegum rannsóknum er hægt að nota það sem litunarefni til að merkja frumur eða vefi. Hins vegar, eins og mörg lyf, getur metýlenblátt einnig haft ýmsar aukaverkanir við notkun:

Aukaverkanir í meltingarfærum

Ógleði og uppköst eru ein af algengustu aukaverkunum í meltingarfærum af metýlenbláu. Þegar metýlenblár berst inn í líkamann getur það örvað slímhúð meltingarvegar, valdið ógleði og jafnvel uppköstum í alvarlegum tilfellum. Þetta einkenni er meira áberandi þegar inndælingarhraði í bláæð er of mikill eða skammturinn er of stór. Til dæmis, í sumum klínískum tilfellum, geta sjúklingar fundið fyrir verulegri ógleði og uppköstum stuttu eftir hraða inndælingu metýlenbláu í bláæð, sem hefur áhrif á þægindi þeirra og meðferðarupplifun. Sumir sjúklingar geta fundið fyrir kviðverkjum eftir að hafa notað metýlenblátt, og hversu mikil sársauki getur verið mismunandi eftir einstaklingsmun, allt frá vægum óþægindum til alvarlegri verkja.

Á sama tíma getur það einnig fylgt niðurgangur, sem getur stafað af truflunum af metýlenbláum á meltingarvegi og meltingarstarfsemi í þörmum, sem leiðir til óeðlilegrar þarmahreyfingar og breytinga á seytingu meltingarvökva. Langtíma eða tíð kviðverkir og niðurgangur hefur ekki aðeins áhrif á líkamlega heilsu sjúklingsins, heldur einnig upptöku og upptöku næringarefnis sjúklingsins.

Aukaverkanir á þvagkerfi

Eftir að metýlenblátt hefur verið notað verður þvagliturinn blár, sem stafar af útskilnaði metýlenbláu og umbrotsefna þess í þvagið í gegnum nýrun. Almennt séð er þessi breyting á lit á þvagi tímabundin og mun ekki hafa alvarleg áhrif á líkamlega heilsu. En í sumum sérstökum tilfellum, eins og sjúklingum með þvagfærasjúkdóma, geta breytingar á þvaglitum truflað greiningu sjúkdómsins og læknar þurfa að framkvæma yfirgripsmikla greiningu sem byggir á öðrum skoðunarvísum. Við þvaglát geta sumir sjúklingar fundið fyrir stingandi tilfinningu við þvagrásaropið.

 

Þetta getur stafað af örvandi áhrifum metýlenblás á slímhúð þvagrásar, sérstaklega þegar þvagþéttni er hár eða slímhúð þvagrásar er nudd við þvaglát, verður stingtilfinningin meira áberandi. Þetta einkenni getur valdið ákveðnum óþægindum hjá sjúklingum og haft áhrif á daglegt líf þeirra.

Taugafræðilegar aukaverkanir

Sundl og höfuðverkur eru algengar taugafræðilegar aukaverkanir af metýlenbláu. Eftir að hafa notað metýlenblátt geta sjúklingar fundið fyrir sundli og stefnuleysi í höfði eða fundið fyrir óþægindum eins og bólgu og verki í höfði. Þetta einkenni getur haft áhrif á athygli og hugsunargetu sjúklingsins og dregið úr skilvirkni í vinnu og lífi. Svimi og höfuðverkur geta tengst áhrifum metýlenblás á æðar og taugar í heila og enn þarf frekari rannsókna á sértæku kerfi. Í mjög sjaldgæfum tilvikum getur metýlenblátt valdið meðvitundarsjúkdómum eins og syfju, dái o.s.frv.

Þetta er venjulega vegna óhóflegrar notkunar á metýlenbláu eða að sjúklingar eru of viðkvæmir fyrir lyfinu, sem veldur alvarlegri hömlun á miðtaugakerfinu. Meðvitundartruflanir eru alvarleg aukaverkun sem getur stofnað lífi sjúklings í hættu og krefst tafarlausrar björgunarmeðferðar.

1.Hver er notkun tíasólýlbláu tetrasólíumbrómíðs?

Hægt er að nota Thiazolyl Blue Tetrazolium Blue (MTT) til að mæla frumufjölgun. MTT framleiðir gulleita lausn sem er breytt í dökkblá, vatns-óleysanleg MTT formazan með hvatbera dehýdrógenasa lifandi frumna.

2.Er Thiazolyl Blue öruggt að geyma?

Hitastig: Lokaðu duftinu og geymdu það í kæli við -20 gráður til að varðveita frost, sem getur í raun lengt geymsluþol (venjulega 1–2 ár); til skammtímageymslu (innan 1 mánaðar) er hægt að geyma það tímabundið við 4 gráðu kæliskilyrði.

Ljós-heldur og raka-kröfur: MTT duft er ljós-næmt og skal geymt í brúnum hvarfefnisflöskum eða gagnsæjum flöskum vafðum með álpappír. Á meðan ætti að bæta við þurrkefnum (td kísilgeli) til að koma í veg fyrir að duftið drekki í sig raka og kex.

3. Mun Thiazolyl Blue litur breytast?

Þegar lausnin sýnir blátt fjólublátt botnfall eða dökknar á litinn gefur það til kynna að hún hafi verið oxuð og ekki er hægt að nota hana áfram.
Forðastu að setja lausnina við stofuhita eða í léttu umhverfi þar sem hún getur fljótt bilað.

maq per Qat: thiazolyl blue cas 298-93-1, birgjar, framleiðendur, verksmiðja, heildsölu, kaup, verð, magn, til sölu