Retatrutide(hlekkur:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/retatrutide-powder-cas-2381089-83-2.html) er efnafræðilega tilbúinn langverkandi GLP-1R/GIPR/GCGR fjölpeptíðörvi, sem er ætlaður til meðferðar á sykursýki af tegund 2 fyrir fullorðna, þyngdarstjórnun og óalkóhólískri fitulifur/óalkóhólískri fituefnabólgu. Ábending fyrir sykursýki af tegund 2 fyrir fullorðna af þessari vöru hefur verið samþykkt til klínískrar notkunar þann 29. ágúst 2023. Auk þess er umsókn um klíníska skráningu á ábendingum fyrir óáfenga fitulifur/óáfenga fituhrörnunarbólgu á lokastigi endurskoðunar. Það eru átta GLP-1R/GIPR/GCGR örvar í þróun í heiminum, þar af hefur Retatrutide frá Rita tekið hraðastum framförum og hleypt af stokkunum þriðja áfanga klínískri rannsókn í júní á þessu ári. Í sama mánuði tilkynnti Rita að síðari áfanga rannsóknargagna um retatrutide hafi verið gefin út á ársfundi ADA, sem sýndi að á 24 vikum náði retatrutide (1 mg, 4 mg, 8 mg eða 12 mg) aðalendapunkti verkunar. mat fyrir of feita eða of þunga þátttakendur án sykursýki, með meðalþyngdartap upp á 17,5%. Meðal aukaendapunkta náðist meðalþyngdartap upp á 24,2% í lok 48 vikna meðferðar. Við höfum einnig búið til peptíðið á rannsóknarstofunni byggt á birtu aðferðinni. Sérstakri nýmyndunaraðferðinni verður lýst stuttlega og hægt er að senda tilteknu skrefin til okkar með tölvupósti.
Aðferð 1:
Nákvæm skref til að búa til Retarutide með því að nota solid-state nýmyndun á rannsóknarstofunni eru sem hér segir:
Undirbúið nauðsynleg hvarfefni og tæki: þar á meðal amínósýrur, díklórmetan, kalíumkarbónat, etoxýlerað kísilgel, asetónítríl, pýridín, N-metýlmorfólín, díísóprópýletýlklóríðgjafa, tríflúorediksýra, DIPEA, Boc verndaðar amínósýrur og önnur hvarfefni, auk segulhræriefna, auk , snúningsuppgufunartæki og önnur tæki.
(1) Nýmyndun Boc-verndaðra amínósýra: Leysið upp nauðsynlegar amínósýrur í díklórmetani, bætið við kalíumkarbónatidufti, hrærið jafnt, bætið við etoxýleruðu kísilgeli, haltu áfram að hræra og bætið síðan við pýridíni og N-metýlmorfólíni til að fá Boc-verndaðar amínósýrur.
(2) Fastfasa nýmyndun: Blandið asetónítríl, díísóprópýletýlklóríðgjafa og tríflúorediksýru saman, hrærið jafnt, bætið við tilbúnum Boc vernduðum amínósýrum og haltu áfram að hræra til að fá fastfasa nýmyndunarafurðina.
(3) Afverndunarhópur: Leysið upp myndun fastfasa í díklórmetani, bætið við tríflúorediksýru, hrærið jafnt og bætið síðan DIPEA við. Haltu áfram að hræra til að fá afverndaða myndun fastfasa.
(4) Hreinsun: Leysið upp varnarlausa fastfasamyndunina í vatni, stillið pH í um 9.0 með natríumhýdroxíðlausn, stillið síðan pH í um 5.0 með ediksýru og að lokum hella út hreinu afurðinni með eter.
Aðferð 2:
Nákvæm skref til að búa til Retarutide með því að nota fljótandi fasa nýmyndun á rannsóknarstofunni eru sem hér segir:
Undirbúðu nauðsynleg hvarfefni og tæki: þar á meðal arginín, glýsín, ediksýruanhýdríð, tríetýlamín, kalíumkarbónat, díklórmetan, metanól, pýridín, N-metýlmorfólín, ediksýruanhýdríð, natríumasetat og önnur hvarfefni, auk tækja eins og hrærivéla, skiltrekta, tómarúmdælur, ofnar og litskiljunarsúlur.
(1) Leysið arginín og glýsín upp í hæfilegu magni af díklórmetani, bætið við hæfilegu magni af ediksýruanhýdríði og tríetýlamíni og hrærið jafnt undir hrærivél.
(2) Flyttu uppleystu blönduna í ofn og hitaðu hana við 80 gráður C í 1 klukkustund til að asetýlera amínósýruleifarnar.
(3) Hlutleysið lausnina sem hvarfað hefur verið með kalíumkarbónatdufti til að hlutleysa ediksýru í lausninni til að mynda natríumasetat, og dragið síðan út myndaða peptíðið út með díklórmetani.
(4) Þvoið útdregna peptíðlausnina með metanóli og síið með lofttæmisdælu til að fá hráa peptíðið.
(5) Leysið upp hráa peptíðið í viðeigandi magni af pýridíni og N-metýlmorfólíni, bætið við viðeigandi magni af ediksýruanhýdríði og natríumasetati og hrærið jafnt undir hrærivél.
(5) Síið lausnina sem hefur hvarfað með lofttæmi, þvoið síukökuna með metanóli og síið síðan með lofttæmisdælu til að fá endanlega Restarutide.
Aðferð 3:
Nákvæm skref til að búa til Retarutide með efnafræðilegum aðferðum á rannsóknarstofunni eru sem hér segir:
Undirbúðu nauðsynleg hvarfefni og tæki: þar á meðal arginín, glýsín, ediksýruanhýdríð, tríetýlamín, kalíumkarbónat, díklórmetan, metanól, pýridín, N-metýlmorfólín, ediksýruanhýdríð, natríumasetat og önnur hvarfefni, auk tækja eins og hrærivéla, skiltrekta, tómarúmdælur, ofnar og litskiljunarsúlur.
(1) Leysið arginín og glýsín upp í hæfilegu magni af díklórmetani, bætið við hæfilegu magni af ediksýruanhýdríði og tríetýlamíni og hrærið jafnt undir hrærivél.
(2) Flyttu uppleystu blönduna í ofn og hitaðu hana við 80 gráður C í 1 klukkustund til að asetýlera amínósýruleifarnar.
(3) Hlutleysið lausnina sem hvarfað hefur verið með kalíumkarbónatdufti til að hlutleysa ediksýru í lausninni til að mynda natríumasetat, og dragið síðan út myndaða peptíðið út með díklórmetani.
(4) Þvoið útdregna peptíðlausnina með metanóli og síið með lofttæmisdælu til að fá hráa peptíðið.
(5) Leysið upp hráa peptíðið í viðeigandi magni af pýridíni og N-metýlmorfólíni, bætið við viðeigandi magni af ediksýruanhýdríði og natríumasetati og hrærið jafnt undir hrærivél.
(6) Síið lausnina sem hefur hvarfað með lofttæmi, þvoið síukökuna með metanóli og síið síðan með lofttæmisdælu til að fá endanlega Restarutide.
Mörg lífræn efnahvörf eru nauðsynleg til að fá marksameindina. Að auki notar þessi aðferð mörg lífræn hvarfefni og flókin rekstrarskilyrði, þannig að efnafræðileg nýmyndun Rotarutide á rannsóknarstofunni er venjulega ekki hentugur fyrir stórframleiðslu eða iðnaðarnotkun. Fyrir stórframleiðslu eða iðnaðarnotkun er algengasta aðferðin að undirbúa Rotarutide með nýmyndunaraðferðum eins og lífmyndun eða fljótandi fasa nýmyndun, sem eru tiltölulega lítil í rannsóknarstofu mælikvarða, tiltölulega einföld í notkun og hentug til að undirbúa lítið magn af vörum . Retarutíðið sem fæst með þessum aðferðum er svipað eða svipað að uppbyggingu og líffræðilegri virkni og Retarutide sem er búið til með efnafræðilegum aðferðum, en hefur þá kosti að það er meiri ávöxtun og auðveldari undirbúningur. Á sama tíma hafa þeir einnig betri iðnvæðingarmöguleika og víðtækari umsóknarhorfur.
Aðferð 4:
Nákvæm skref til að búa til Retarutide með líffræðilegum aðferðum á rannsóknarstofunni eru sem hér segir:
Undirbúningur nauðsynlegra gena og hvarfefna: Fáðu plasmíð sem innihalda Retatrutide genið úr genasafninu, umbreyttu plasmíðunum með viðtökufrumum (eins og Escherichia coli) og fáðu verkfræðilegar bakteríur sem innihalda Retatrutide genið.
(1) Rækta verkfræðilegar bakteríur: Við viðeigandi hitastig, pH og jónstyrksskilyrði, notaðu ræktunarmiðil til að rækta verkfræðilega bakteríur, sem gerir þeim kleift að fjölga sér í miklu magni.
(2) Útdráttur Retarutide: Ræktuðu verkfræðibakteríurnar eru muldar með því að nota crusher og frumubrot eru aðskilin frá Retarutide með aðferðum eins og ofsíun og setmyndun til að fá hráafurðina.
(3) Hreinsun á Retarutide: Hráa Retarutide er hreinsað með litskiljunartækni til að fá háhreinleika Retarutide.
Greining og auðkenning rótarútíðs: Notaðu hágæða vökvaskiljun, massagreiningu, kjarnasegulómun og aðrar aðferðir til að greina og bera kennsl á uppbyggingu hreinsaðs rótarútíðs.
Efnahvarfajöfnan fyrir líffræðilega myndun Retarutide á rannsóknarstofunni felur aðallega í sér efnahvörf meðan á genatjáningarferlinu stendur, þar á meðal tvö skref: umritun og þýðingar.
Umritun: DNA tvístrengd opnast, með því að nota einn streng sem sniðmát til að búa til RNA þræði, sem krefst þátttöku RNA pólýmerasa. Viðbragðsjafnan er sem hér segir:
DNA tvíþátta: DNApol → mRNA+DNApol
Þýðing: Ríbósóm bindast mRNA til að mynda peptíðkeðjur, ferli sem krefst þátttöku amínósýra og orku. Viðbragðsjafnan er sem hér segir:
Ríbósóm+mRNA → Peptíðkeðja+GDP+Pi+H2O
Peptíðkeðja+ATP → Peptíðkeðja+AMP+PPi
Þar á meðal táknar DNApól DNA pólýmerasa; MRNA táknar boðbera RNA; Ríbósóm tákna ríbósóm; Peptíðkeðjur tákna fjölpeptíðkeðjur; Landsframleiðsla táknar gúanósín tvífosfat; Pí táknar ólífræna fosfórsýru; H2O táknar vatn; ATP táknar adenósín þrífosfat; AMP táknar adenósín mónófosfat; PPi táknar ólífrænt pýrófosfat. Þessi viðbrögð mynda peptíðkeðjurnar sem þarf til að mynda Retarutide, sem síðan eru unnar og breytt á síðari stigum til að fá Retarutide.
Ofangreind eru algengar aðferðir við myndun rótarutíðs á rannsóknarstofunni, hver með mismunandi kosti, galla og notkunarsvið. Rannsóknarstofan notar venjulega fljótandi fasa nýmyndun og fastfasa nýmyndun aðferðir fyrir smáframleiðslu til rannsókna og tilrauna; Iðnaðarframleiðsla, aftur á móti, samþykkir blöndu af lífmyndun og fljótandi/föstu fasaframleiðslu fyrir stórframleiðslu til að mæta eftirspurn á markaði. Það skal tekið fram að þessar aðferðir krefjast strangrar hagræðingar á ástandi og ferlistýringar til að tryggja gæði og hreinleika lokaafurðarinnar.