Fluralaner töflukerfi: GABA viðtakamiðun

Gæludýraeigendur um allan heim glíma við flóa- og merkismit sem skaða gæludýr þeirra. Dýralæknar og gæludýraeigendur gætu tekið betri meðferðarval með því að skilja hvernig sníkjulyf virka sameindalega.Fluralaner taflasveita lengri vernd með taugafræðilegri miðunaraðferð sinni, nýsköpun í dýralyfjafræði. Þetta kerfisbundna skordýraeitur truflar viðtakaferli sníkjudýra í taugakerfi í marga mánuði -langa virkni frá einum skammti til inntöku.

Sértæk taugaeiturhrif efnasambandsins koma frá samspili þess við taugavef liðdýra klóríðganga fléttur. Þessi lyfjafræðilega bylting heldur lækningalegum styrk í blóði og vefjum lengur en venjulega meðferð. Skordýrataugaviðtakar hafa margar stærðargráður meiri bindisækni en skotmark spendýra, sem veita dýrum öryggi á meðan þeir drepa sníkjudýr sem nærast.

Fluralaner tafla

1.Almenn forskrift (á lager)
(1) Lausn
(2) Spjaldtölva
(3) Inndæling
(4) Úða
(5) Dropar
2.Sérsnið:
Við munum semja fyrir sig, OEM / ODM, ekkert vörumerki, eingöngu til rannsóknar á vísindum.
Innri kóða: BM-2-079
Fluralaner CAS 864731-61-3
Aðalmarkaður: Bandaríkin, Ástralía, Brasilía, Japan, Þýskaland, Indónesía, Bretland, Nýja Sjáland, Kanada o.fl.
Framleiðandi: BLOOM TECH Xi'an Factory
Greining: HPLC, LC-MS, HNMR
Tæknistuðningur: R&D Dept.-4

Hlutverk GABA-lokaðra klóríðrása í liðdýra taugafræði

 

Gamma-amínósmjörsýra, aðal taugaboðefnið sem hægir á taugasendingum í hryggdýrum og hryggleysingjum, hefur ýmsa uppbyggingu í mismunandi tegundum. GABA viðtakar eru grafnir í taugafrumum flóa, mítla og mítla sem bindill-stýrður klóríðganga fléttur. Klóríðjónir komast inn í taugafrumur þegar GABA sameindir bindast þessum viðtakastöðum hjá heilbrigðu fólki. Himnan verður jákvætt hlaðin og minna spennt. Þetta ferli stjórnar taugafrumum og kemur í veg fyrir villandi hvatir.Fluralaner töflur trufla þetta eftirlitskerfi með því að keppa við það. Sameindabyggingin gerir sameindinni kleift að festast við GABA viðtaka án þess að virkja rásir.

 

Þegar lyfið hefur verið tengt kemur það í veg fyrir að náttúrulegar taugaboðefnasameindir nái á áfangastað. Samskiptarásir sem koma í veg fyrir taugavirkni eru stöðvaðar. Sníkjutaugafrumur missa stjórn á rafvirkni, sem veldur óstöðvandi afskautun og lömun.

Sértæk eiturhrif með verndun blóðsins-heilahindrun

GABA viðtakar spendýra finnast aðallega í miðtaugakerfinu. Þau eru varin með sérstökum háræðaveggjum sem gera sameindum erfitt fyrir að fara í gegnum. Tight junction prótein og útflæðisflutningstæki eru notuð af blóð-heilaþröskuldinum til að koma í veg fyrir að flest framandi efni berist inn í heilablóðrásina. Sameindabygging Fluralaner kemur í veg fyrir að lyfið fari djúpt inn í miðtaugakerfi hunda og katta. Þetta þýðir að lyfið getur aðeins haft áhrif á vefi að utan og blóðflæði.Sníkjudýr sem nærast á blóði frá gæludýrum sem hafa verið meðhöndluð taka lækningaskammta beint inn í meltingarkerfi þeirra. Efnið frásogast fljótt í gegnum þekjuþekju liðdýra,

dreifist í gegnum blóð þeirra og hittir fyrirhuguð taugamark þess án vandræða. Þessi lyfjahvarfafræðilegi munur gerir stórt öryggisbil á milli meðferðarskammta og eiturefnaskammta fyrir gæludýr á sama tíma og styrkurinn sem er banvænn fyrir utanlegssníkjudýr heldur áfram.

Hversu lengi það virkar byggt á fitusækinni dreifingu

 

Fitusæknir eiginleikar efnasambandsins gera það auðvelt að dreifa því víða í fituvef og losna hægt yfir langan tíma. Eftir að það hefur verið tekið inn um munn fer plasmapróteinbindingin yfir 99%, sem myndar lón sem fyllist hægt og rólega af styrkleika óbundinna lyfja. Geymsla fitu heldur blóðþéttni yfir lágmarksstyrk í tólf vikur hjá hundum, og jafnvel lengur ef réttur skammtur er gefinn. Vegna þessa lyfjahvarfasniðs breytast meðferðaráætlanir frá því að nota lyfið oft í að gefa það á þriggja mánaða fresti. Gæludýraeigendur hagnast á minna álagi þegar þeir meðhöndla gæludýr sín og betri hlýðni. Á sama tíma kemur regluleg útsetning fyrir lyfi í veg fyrir að sníkjudýr verði ónæmur.

 

Vegna lengri virknitíma verða engin hlé á þjónustu á háannatíma.

Tvö-hluti vélbúnaður með mörgum viðtakamarkmiðum

Auk þess að hindra GABA viðtaka, hefur fluralaner sterk blokkandi áhrif á glútamat-stýrðar klóríðgöng sem finnast aðeins í taugakerfi hryggleysingja. Þessar rásir eru mjög mikilvægar fyrir taugamót krabbadýra og skynjun. Þeir opna klóríð-sérhæfðar svitaholur sem svar við bindingu glútamattaugaboðefna. Hjá sníkjuliðdýrum hjálpar jónaflæðið sem myndast við hreyfijafnvægi, fæðuvenjur og hvernig þeir bregðast við umhverfi sínu. Þessi tveggja-markmiðaaðferð er notuð ífluralaner taflaútgáfu til að gera það skilvirkara gegn fjölmörgum tegundum sníkjudýra. Áhrif GABA viðtaka aukast með því að binda val á glútamatrásum,

sem veldur samverkandi taugaeiturhrifum sem eru sterkari en varnir líkamans. Þegar margar mikilvægar boðleiðir eru lokaðar á sama tíma er erfiðara fyrir sníkjudýr að aðlagast. Þetta þýðir að ólíklegri þróun viðnáms gerist en með efnasamböndum með einum -virka.

Hvernig sameindir bindast og hvernig viðtakar eru uppteknir

 

Sameindin fyllir viðtakabindandi vasa í gegnum nokkra snertistað, samkvæmt kristallfræðilegum rannsóknum. Þetta myndar óhreyfanlegar lyfja-viðtakasamstæður. Vetnistengi, vatnsfælin víxlverkanir og van der Waals kraftar auka bindingarorku yfir efnafræðileg skyldleika. Nanómólar sundrunarfasti sýnir þétta bindingu sem rofnar ekki jafnvel þegar sníkjufrumur endurvinna viðtakann. Lágir lyfjaskammtar loka nánast öllum rásum í liðdýrategundum, samkvæmt rannsóknum á nýtingu viðtaka. Mismunandi mítla- og flóategundir hafa sambærilegan hálf-hámarks hamlandi skammta, sem bendir til svipaðs viðtakabyggingar. Þetta gerir manni kleift að meta hversu áhrifarík meðferðin mun virka í ýmsum löndum og með mismunandi sníkjudýrum án þess að breyta skömmtum.

Áhrif lokunar á rásum á líkamann

Þegar bæði GABA- og glútamat-stýrðar rásir hætta að virka á sama tíma verða taugakerfi sníkjudýra mjög úr jafnvægi. Þegar hreyfitaugafrumur skjóta stjórnlaust valda þær stífkrampa vöðvasamdrætti sem gera liðdýr ófær um að hreyfa sig. Skyntaugafrumur hætta að geta tekið við upplýsingum um umhverfi sitt, sem breytir því hvernig þær borða og leita að hýslum. Samanlögð áhrif valda hraðri lömun innan nokkurra klukkustunda frá útsetningu fyrir lyfinu, fylgt eftir með dauða vegna efnaskiptaþreytu eða ofþornunar. Meðhöndluðu sníkjudýrin sýna alvarlegar taugaskemmdir við rafeindamyndgreiningu, með bólgnum taugamótum og niðurbroti á axonum. Þessar útbyggingarbreytingar sýna að ferlið felur í sér meira en bara að loka rásum tímabundið.

Það felur einnig í sér skemmdir á frumum af völdum -langtíma innstreymi kalsíums og oxunarálagi. Alvarleiki heilaskemmda þýðir að jafnvel lítil-útsetning skaðar getu sníkjudýranna til að fjölga sér og halda sér í formi, sem hefur áhrif á fækkun íbúa umfram bein drápsáhrif.

Þróunarfræðileg verndun marksvæða

 

GABA-miðluð taugaboð eru ein elsta og stöðugasta leiðin fyrir samskipti dýra. Það hefur fundist í tegundum sem eru hundruð milljóna ára á milli í þróun. Vegna þess að hamlandi taugaboð eru svo mikilvæg fyrir starfsemi taugakerfisins eru takmörk fyrir því hversu mikið viðtakabyggingar geta breyst á meðan þeir gegna lífeðlisfræðilegu hlutverki sínu. Vegna þessa eru GABA viðtakar góð skotmörk fyrir lyf vegna þess að efni sem vinna gegn núverandi sníkjudýrahópum eru líkleg til að vinna gegn framtíðarútgáfum. Til að gera lyf sértækari og skilvirkari rannsaka vísindamenn hvernig viðtakar virka og hvernig þeim er stjórnað.

Læknaefnafræðingar geta bætt frammistöðu efna með því að komast að því hvernig bindistaður flúralaner og viðtaka hafa samskipti sín á milli á sameindastigi. Uppbyggingar-virknitengslarannsóknir finna sameindaeiginleikana sem hafa mest áhrif á bindishækni. Þetta hjálpar vísindamönnum að búa til nýjar sameindir sem eru öruggari eða virka í lengri tíma.

Að takast á við uppgang mótstöðunnar með því að skilja hvernig það virkar

Skordýraeiturþol í liðdýrum er stórt vandamál í landbúnaði og dýralækningum. Þetta ónæmi stafar venjulega af breytingum á markstöðum sem gera það erfiðara fyrir lyf að bindast. Vísindamenn geta fylgst með mótstöðuaðferðum og fundið upp leiðir til að vinna bug á þeim ef þeir skilja að fullu hvernig mismunandi gerðir af fluralaner töflum hafa samskipti við viðtakaprótein. Með því að fylgjast með stofnum sníkjudýra erfðafræðilega má finna breytingar á GABA- og glútamatviðtakagenunum áður en þau valda víðtæku svipgerðarþoli. Tvöfaldur-markmiðunarbúnaðurinn lækkar náttúrulega valþrýstinginn fyrir ónæmi samanborið við efnasambönd sem hafa aðeins áhrif á eitt sameindamarkmið. Til að vera raunverulega ónæmur,

sníkjudýr þurfa að fá stökkbreytingar í fleiri en einu geni á sama tíma, sem er mun ólíklegri atburður en breytingar á aðeins einu geni. Þessi erfðafræðilega hindrun fyrir þróun ónæmis gerir það að verkum að fluralaner-vörur endast lengur og dregur úr fjölda skipta sem þær virka ekki á sviði.

Þýðingarnotkun utan dýralækninga

 

Lyfjarannsóknir á dýrum eru oft notaðar til að bæta læknisfræði manna. Þetta á sérstaklega við á hitabeltissjúkdómasvæðum þar sem liðdýraferjur dreifa sýkla. GABA viðtaka-miðað efnasambönd sem búin eru til fyrir skaðvalda í landbúnaði og dýralæknasníkjudýr geta verið notuð sem fyrirmyndir til að búa til skordýraeitur og fráhrindandi efni fyrir fólk. Að læra um hvernig lyfjafræði viðtaka er mismunandi í mismunandi tegundum hjálpar vísindamönnum að búa til öruggari efni sem hægt er að nota í kringum börn og gæludýr. Rannsóknaraðferðirnar sem búnar eru til með því að búa til fluralaner eru gagnlegar á sviði taugavísinda og læknisfræði í heild. Ligand-virkni jónarása er grundvallarhugtak í taugalíffræði sem er mikilvægt til að skilja flog,

kvíða og svefnvandamál hjá fólki. Mæling á hlutum eins og nýtingu viðtaka, rásleiðni og taugamótunarvirkni er hægt að nota á mismunandi sviðum rannsókna, sem flýtir fyrir framförum á mörgum lækningasviðum á sama tíma.

Lyfjahvarfaeiginleikar sem styðja við lengri virkni

Frásog lyfja til inntöku yfir þekjuvef þarma er hratt og hámarksþéttni í plasma næst innan dags. Efnasambandið gangast undir takmarkað umbrot í fyrstu-ferð; því getur foreldrislyfið enn borist til ákveðinna vefja. Útreikningar á dreifingarrúmmáli sýna að lyfið kemst í gegnum vefi út fyrir blóðrásarhólf. Þetta samsvarar fitusæknum gegnumgangi inn í frumuhimnur og fitugeymslu. Lyfið skilst smám saman út um lifur og nýru, í samræmi við helmingunartíma brotthvarfs. Í hundalíkönum er helmingunartími- lengri en einn mánuður. Þetta seinka brotthvarf viðheldur lækningastyrk í tólf vikur.

Líffræðileg virkni cýtókróm P450 oxaðra umbrotsefna er minni en móðurlyfsins. Með endurteknum skömmtum er ólíklegra að virk umbrotsefni safnist upp.

Gögn um virkni yfir marksníkjudýrategundir

 

Í klínískum vettvangsrannsóknum fækkaði fullorðnum flóum um 98–100% innan 48 klukkustunda frá meðferð, sem sýnir að það virkar mjög vel gegn Ctenocephalides felis sýkingum. Þetta snögga dráp kemur í veg fyrir að flóar sem enn eru á lífi verpi eggjum, sem stöðvar æxlunarferli þeirra og kemur í veg fyrir að umhverfið mengist af óþroskuðum lífsstigum. Sýnt hefur verið fram á að afgangsvirkni heldur flóum í skefjum, jafnvel þegar þær halda áfram að koma aftur, eins og á heimilum með mörg gæludýr og aðgang að útiveru. Mítlar virka á mismunandi hátt á mismunandi tegundir, en þvert á Ixodes, Dermacentor og Rhipicephalus hópana losna þeir alltaf við meira en 95% af sníkjudýrunum sem tengjast.

Þegar gæludýr eru meðhöndluð eru mítlar ólíklegri til að festast og nærast í styttri tíma þegar þeir gera það. Þetta takmarkar líkurnar á að sýkla berist. Efnasambandið ífluralaner taflas drepur mítla áður en þeir geta nærst á nægu blóði til að dreifa sjúkdómum. Þetta verndar gegn Lyme sjúkdómi, ehrlichiosis og anaplasmosis umfram það að losa sig við sníkjudýr.

Öryggissnið í markdýrastofnum

Margar öryggisrannsóknir á heilbrigðum og veikum dýrum sýna að það er mikið bil á milli skaðastigs og lækningalegs ávinnings. Blóðfræði, blóðefnafræði og þvaggreiningarráðstafanir breytast ekki á þann hátt sem er klínískt marktækur þegar mismunandi hundategundir fá sama skammt. Rannsóknir á eiturverkunum á æxlun sýna að þegar það er notað í ræktunarlotum hefur það engin áhrif á frjósemi, afleiðingar meðgöngu eða vöxt afkvæma. Taugarannsóknir á dýrum sem fengu lyf sýna að þau breyttu ekki í hegðun eða eru með hreyfivandamál vegna lyfjanna. Þetta sannar að blóð-heilaþröskuldurinn virkar rétt. Tilkynningar um sjaldgæfar aukaverkanir í eftir-markaðseftirliti gerast á svipuðum hraða og sést í hópum sem ekki hafa verið meðhöndlaðir,

sem styður öryggisniðurstöður úr stýrðum rannsóknum. Efnið er nógu öruggt til að nota á ung dýr allt niður í átta vikna gömul og á eldra fólk sem þegar hefur heilsufarsvandamál.

Truflun á frumuboðum í taugafrumum í sníkjudýrum

 

Að hindra hamlandi klóríðgöng hefur afleiðingar umfram það að minnka ofskautun himna í taugakerfi sníkjudýra. Langtíma afskautun virkjar spennu-stýrð kalsíumgöng, sem flæða umfrymið með kalsíumjónum sem virkja margar boðleiðir. Mikið kalsíummagn í frumum losar taugaboðefni, virkjar ensím og kveikir á genaumritunaráætlunum sem hafa skammtímaávinning en verða eitruð með tímanum.ATP-myndun hættir og hvarfgjarnar súrefnistegundir skaða stórfrumusameindir þegar kalsíum í hvatbera er of hátt. Lipid peroxidation eyðileggur heilleika himnunnar,

en próteinoxun rýrir virkni og uppbyggingu ensíma. DNA skemmdir vegna ofhlaðs viðgerðaraðferða kallar á frumudauða taugafrumna. Þessar aðgerðir í kjölfar rásarstíflu styrkja fyrstu lyfjaáhrifin og drepa sníkjudýrið jafnvel þegar viðtaka er lítill.

Samþætting við meðfædd ónæmissvörun

Nýjar rannsóknir benda til þess að þegar sníkjudýr deyja losi þau sameindir sem hjálpa ónæmiskerfi hýsilsins. Þessar sameindir þekkjast af mynsturþekkingarviðtökum, sem eykur viðbrögð ónæmiskerfisins á viðhengisstöðum. Þetta samband milli lyfja sem drepa sníkjudýr og ónæmiskerfis hýsilsins getur hjálpað til við að útskýra hvers vegna meðhöndluð dýr höfðu færri bólgusvörun. Þegar sníkjudýr deyja fljótt, hafa þau ekki tíma til að nærast í langan tíma, sem getur valdið ofnæmisviðbrögðum. Þegar fjöldi sníkjudýra í líkamanum minnkar, minnkar framleiðsla mótefnavaka og frumuvaka sem valda ofnæmishúðbólgu. Þegar gæludýr eru meðhöndluð með flóaofnæmishúðbólgu,

fluralaner töfluútgáfur hjálpa húðsárum að gróa hraðar en aðrir, hægari-verkunarvalkostir. Þessi klíníska niðurstaða sýnir að hvernig meðferð virkar hefur ekki aðeins áhrif á lifun sníkjudýra heldur einnig ónæmiskerfið á sýkingarstöðum, og hjálpar á annan hátt en bara að drepa sníkjudýr.

Umhverfisáhrifasjónarmið

 

Skilningur á því hvernig efnasambandið endar í umhverfinu hjálpar til við ábyrgar notkunartillögur og endurskoðun reglugerða. Rannsóknir á niðurbroti í jarðvegi og vatni sýna að ljósgreining og örveruefnaskipti brjóta hlutina hægt niður. Á vettvangi eru helmingunartímar-mældir í vikum. Prófanir á eiturhrifum í vatni sýna að sumar hryggleysingjategundir eru viðkvæmar og því verður að gæta þess að vatnið mengist ekki við notkun eða meðhöndluðum dýraúrgangi. Vegna mikillar próteinbindingar og vefjadreifingar kemur efnasambandið í veg fyrir að virka móðurlyfið fari úr líkamanum í gegnum þvag og saur. Þetta dregur úr umhverfisáhrifum samanborið við valkosti sem eru ekki eins vel frásogaðir.

Skordýr sem éta meðhöndlaðan dýraúrgang éta nóg af leifum til að gera ræktun erfiðari. Þetta vekur áhyggjur af áhrifum á stofn bjalla í hagaumhverfi sem ekki er ætlað að gerast. Bestu stjórnunarhættir og rannsóknir á lyfjaformum sem draga úr umhverfisþoli en halda lækningavirkni eru byggðar á þessum vistfræðilegu áhyggjum.

Fluralaner taflaflókið sameindakerfi sýnir dýralyfjanýjungar. Þetta gæludýra-örugga lyf drepur útlægssníkjudýr í gegnum GABA- og glútamat-klóríðgöng. Vikuleg sníkjudýravarnir verða ársfjórðungslega með lengri tíma. Þetta hvetur eigendur til að ljúka meðferð og forðast sníkjudýr.

Skilningur á heilaaðgerðum fluralaner hjálpar til við að stjórna mótstöðu, auka virkni og sameina það með stjórntækjum. Þetta efni drepur sníkjudýr og hjálpar vísindamönnum að búa til betri lyf með því að miða á GABA viðtaka. Meiri rannsóknir á því hvernig þetta lækningatæki hefur áhrif á frumur, líkama og umhverfi munu auka starfshætti og uppgötva ný notkun.

Heilsumeðferðir fyrir gæludýr nota í auknum mæli sönnunargögn og vélrænni þekkingu frekar en athugun. Fluralaner taugalíffræði gögn auka sameinda nákvæmni í dýralyfjafræði. Vélrænar meðferðir eins og fluralaner eru nauðsynlegar til að koma í veg fyrir heilsu dýra þar sem sníkjudýrasýkingar hafa áhrif á dýr um allan heim.

Bloomtechz stendur sem áreiðanlegur fluralaner töflubirgir þinn, studdur af yfir 12 ára sérfræðiþekkingu í lífrænni myndun og lyfjafræðilegum milliefnum. 100.000-fermetra-metra framleiðslustöðvar okkar eru GMP-vottaðar og hafa verið samþykktar af bandaríska-FDA, ESB, PMDA og CFDA. Þetta þýðir að vörurnar sem þú færð munu uppfylla ströngustu alþjóðlegu gæðastaðla. Við gefum þér fullar greiningarskýrslur með HPLC, LC-MS og HNMR gögnum til að hjálpa þér við náms- og viðskiptaþarfir þínar, með nákvæmri efnislýsingu byggða á vísindum.

Sérhæfða rannsóknar- og þróunarteymið okkar (R&D) og gæðatryggingadeildin nota þrefaldar-prófunaraðferðir til að tryggja að lyfjaþróunaráætlanir þínar séu í samræmi frá lotu til lotu og fylgi öllum reglum. Bloomtechz býður upp á samkeppnishæf verð, áreiðanlegar aðfangakeðjur og skjótan tækniaðstoð, hvort sem þú þarft rannsóknar-magn fyrir rannsóknarstofurannsóknir eða magnframleiðslu fyrir atvinnuframleiðslu. Við vitum hversu mikilvæg gæði, skjöl og afhending á -tíma er vegna þess að við erum viðurkenndir veitendur 24 stórra erlendra fyrirtækja í lyfja- og líftækniiðnaði.

Hafðu strax samband við tæknifræðinga okkar klSales@bloomtechz.comað tala um þarfir þínar fyrir afluralaner taflaog komdu að því hvernig Bloomtechz's allt-í-þjónustuvettvangur getur hjálpað þér að ná námsmarkmiðum þínum hraðar með raunverulegum kínverskum framleiðsluávinningi.

1. Ozoe Y, Asahi M, Ozoe F, o.fl. Sníkjulyfið ísoxazólín A1443 er öflugur blokkari fyrir -klóríðgöngum skordýrabindils. Lífefnafræðileg og lífeðlisfræðileg rannsóknasamskipti. 2013;435(3):327-332.

2. Gassel M, Wolf C, Noack S, o.fl. Hið nýja ísoxazólín ectoparasiticide fluralaner: sértæk hömlun á liðdýra -amínósmjörsýru- og L-glútamat-stýrðum klóríðgöngum og skordýraeitrandi/acaricide virkni. Skordýralífefnafræði og sameindalíffræði. 2014;45:111-124.

3. Kilp S, Ramirez D, Allan MJ, o.fl. Lyfjahvörf flúralans hjá hundum eftir staka inntöku eða gjöf í bláæð. Sníkjudýr og vektorar. 2014;7:85.

4. Walther FM, Allan MJ, Roepke RK, o.fl. Öryggi fluralaner tuggutaflna (Bravecto), nýtt altækt sníkjudýralyf, hjá hundum eftir inntöku. Sníkjudýr og vektorar. 2014;7:87.

5. Rohdich N, Roepke RK, Zschiesche E. Slembiraðað, blindað, stýrt og fjöl-miðað vettvangsrannsókn þar sem borin er saman virkni og öryggi Bravecto (fluralaner) gegn Frontline (fipronil) hjá hundum með flóa- og-mítla. Sníkjudýr og vektorar. 2014;7:83.

6. Williams H, Young DR, Qureshi T, o.fl. Fluralaner, nýtt ísoxazólín, kemur í veg fyrir æxlun flóa (Ctenocephalides felis) in vitro og í eftirlíkingu heimaumhverfis. Sníkjudýr og vektorar. 2014;7:275.