Sephadex G75er eins konar gelsíunarfylling með góðum árangri. Það er útbúið með krossbindandi dextran og epichlorohydrin. Það er perlulaga hlaup með miklu magni af hýdroxýlhópum, sem auðvelt er að bólgna í vatns- og salta lausnum. Hámarks útilokunarmörk þessa efnasambands eru 80000 og sérstök bólgupróf fer eftir magni af þurru plastefni og rekstrarskilyrðum. Til dæmis, við vissar aðstæður, getur bólgunarstig þurrt plastefni verið 519 ml/g. Þegar pH -svið rekstrar er 6.210 (5.210 fyrir sumar vörur) getur efnasambandið verið stöðugt. Mælt er með því að geyma það við stofuhita, kaldur og fjarri ljósi á hitastigssviðinu 430 gráðu (eða 425 gráðu) til að viðhalda afköstum sínum og stöðugleika. Þetta efni er sérstaklega hentugt fyrir stórar lífmólýlur með mólmassa sem er meiri en 80000. Aðallega notaður til afsölunar og bufferaskipti á svo stórum lífmólýlum. Í gegnum einn - skref aðgerð er mögulegt að afnema fljótt, fjarlægja mengunarefni og flytja sameindir yfir í nýja biðminni lausn. Til viðbótar við afsölun og buffer skipti, er Sephadex G-75 einnig hentugur fyrir hreinsunarferli stórra lífmolekna.
 |
 |
Sephadex G75er dextran hlaup, sem er aðallega notað við aðskilnað og hreinsunartækni í lífefnafræði og sameindalíffræði. Helstu notkun þessa efnis eru eftirfarandi:
Í afsölunarferlinu getur það í raun fjarlægt sölt (venjulega lítil sameind ólífræn sölt) úr líffræðilegum sameindalausnum. Kosturinn við þetta efni er að það er auðvelt í notkun, hratt og getur náð skilvirkri afsöltun án þess að breyta virkni lífmólekna. Að auki, vegna framúrskarandi efnafræðilegs stöðugleika og lífsamrýmanleika, er það hentugur til afsöltunarmeðferðar á ýmsum lífmólýlum, þar með talið próteinum, peptíðum, kjarnsýrum osfrv. Í hagnýtum notkun er hlaup desalting venjulega sameinuð öðrum hreinsunartækni eins og jónaskiptum, sækni litskiljun osfrv., Til að ná yfirgripsmiklum hreinsun og aðskilnaði á lífeðlum.
Þetta efni hefur mikið úrval af forritum í biðminni, sérstaklega á sviðum lífefnafræði og sameindalíffræði. Til dæmis, í próteinhreinsuninni er stundum nauðsynlegt að flytja prótein frá einu stuðpúða kerfi yfir í annað stuðpúða sem hentar betur fyrir stöðugleika þeirra og virkni. Og þetta efni getur í raun náð þessu markmiði; Í því ferli kjarnsýruútdráttar er einnig nauðsynlegt að aðgreina kjarnsýruna frá lausninni sem inniheldur óhreinindi og sölt og flytja það yfir í nýjan biðminni til síðari aðgerða. Það á einnig við um þessa atburðarás; Meðan á frumurækt stendur er stundum nauðsynlegt að skipta um ræktunarmiðil eða jafnalausn til að viðhalda frumuvöxt og virkni. Það er hægt að nota til að fjarlægja skaðleg efni úr gömlum menningarmiðlum eða stuðpúða og kynna nýja menningarmiðla eða stuðpúða.
Sameindasigling
Í próteinrannsóknum og undirbúningsferlum er venjulega nauðsynlegt að aðgreina markprótein frá flóknum blöndum. Það getur aðskilið prótein út frá stærð þeirra og þar með náð próteinhreinsun. Með því að aðlaga skolunaraðstæður, svo sem jónstyrk og pH gildi skolsins, er hægt að fínstilla aðskilnað skilvirkni próteina frekar. Til viðbótar við prótein og kjarnsýrur er einnig hægt að nota það til að aðskilja og hreinsa aðrar lífmólýlur, svo sem fjölsykrum, ensím, mótefni osfrv. Hraði þessara líffræðilegra lífeðlra í hlaupi veltur á stærð þeirra og lögun, svo að ná árangri aðgreiningar. Þrátt fyrir að þetta efni sé ekki beint notað sem tæki til að ákvarða mólmassa getur það þjónað sem hjálpartæki við ákvörðun sameindaþyngdar.
Í því ferli að hreinsa prótein er venjulega nauðsynlegt að fjarlægja lítil sameind óhreinindi eins og sölt, umbrotsefni lítil sameinda, óbundin bindla osfrv. Úr próteinlausninni. Þetta efni getur í raun fjarlægt þessar litlu sameindar óhreinindi úr próteinlausnum og þar með bætt hreinleika próteina. Sameindarsigtáhrif þess gera kleift að fjarlægja þessi litlu sameinda óhreinindi á áhrifaríkan hátt, sem leiðir til hreinna kjarnsýrna. Undirbúningur ensíma innihalda venjulega lítil sameind óhreinindi eins og óbætt hvarfefni, hemlar, umbrotsefni osfrv. Þessi óhreinindi geta haft áhrif á virkni og stöðugleika ensíma. Með gelsíun efnisins er hægt að fjarlægja þessi litlu sameinda óhreinindi á áhrifaríkan hátt og hægt er að bæta hreinleika ensímblöndu. Auk próteina og kjarnsýrna,
Herma eftir umbreytingu millifrumna
Innra frumu merkja umbreytingar er kjarna reglugerðarvirkni lífsstarfsemi, sem felur í sér flókna ferla eins og frumuþekkingu, umbreytingu merkja og lífeðlisfræðileg svörun. Hefðbundnar rannsóknir treysta oft á lifandi frumulíkön, en það eru takmarkanir eins og flókin merkjakerfi og margir truflandi þættir.Sephadex G75er klassískur dextran gel síunarmiðill. Porous uppbygging þess og sameindasiguráhrif veita einstakt líkamlegt líkan til að líkja eftir umbreytingu millifrumna merkja.
Líkamlegt líkan til að líkja eftir umbreytingu millifrumna með Sephadex G-75
Eftirlíking af millifrumum bilum
Gap Junction er vatnssækinn farvegur sem myndast á milli aðliggjandi frumna í gegnum tengilinn, sem gerir kleift að skipta um litlar sameindir með mólmassa<1500 Da. The pore size range of Sephadex G-75 (40-300 μ m) is much larger than that of intercellular junctions (about 1.5 nm), but its porous structure can simulate molecular diffusion processes in local microenvironments. For example:
Stigamyndun merkjasameinda: Mismunandi styrkur merkjasameinda (svo sem CAMP, CA ²+) er hlaðinn í hlaupsúluna. Hægt er að sjá mismuninn á dreifingarhraða litlu sameinda í hlaupholinu með sameinda sigtiáhrifum og hægt er að herma eftir halla á efnafræðilegum merkjum milli frumna.
Samverkandi svörun eftirlíkingar: Tvær samverkandi sameindir (svo sem bindill og viðtaka) eru hlaðnar á báðum endum hlaupsúlunnar í sömu röð og bindandi hreyfiorka þeirra er greind með skolunartímabilinu til að líkja eftir sameindaþekkingarferlinu í beinum snertingu samskiptum milli frumna.
Eftirlíking af sameindasambandi á yfirborð himnunnar
Samskipti milli yfirborðssameinda himna treysta á sértækar milliverkanir yfirborðspróteina frumuhimna. Sephadex G-75 getur hermt eftir þessu ferli með virkni breytinga:
Viðtaka bindandi tilraun: Biotinylated viðtakaprótein (svo sem EGFR) eru fest á yfirborði hlaupagnir, flúrljómandi merktir bindlar (svo sem EGF) eru teknir í gegnum streptavidin lítínkerfið og fylgst er með bindandi merkisstyrk með flúrljómun til að meta viðtaka tengslin.
Samkeppnisbindingargreining: Forhleðsla viðtaka bindill fléttunnar í hlaupsúlunni, bættu samkeppnishemlum af mismunandi styrk (svo sem and -EGFR mótefnum), reiknaðu hindrunarstöðuna (ki) í gegnum skolunarhámarksbreytingu og líkja eftir íhlutunaráhrifum lyfja á frumu merkisferða.
Eftirlíking af efnaflutningi
Efnafræðileg merki um dreifingu á dreifingu efnamerkjasameinda (svo sem hormóna og cýtókína) sem eru seytt af frumum í gegnum líkamsvökva eða utanfrumu fylki til markfrumna. Sephadex G - 75 getur smíðað þrívíddar dreifingarlíkan:
Eftirlíking paracrine kerfisins: seytingarfrumur (svo sem átfrumur) og markfrumur (svo sem T frumur) eru umluknar í hlaup örkúlum og virkjunarstaða markfrumna (svo sem CD69 tjáning) sést með CO ræktun til að líkja eftir staðbundnum áhrifum paracrine merkja.
Innkirtlamerkjasending: Flúrljómandi merkt hormón (svo sem insúlín) eru hlaðin í hlaupdálkinn og samspil þeirra við hlauphola er greind í gegnum skolunartíma og spáð er helmingi - lífshormóna í blóðrás og dreifingu markfæra með því að sameina stærðfræðilíkön.
Umsóknartilfelli Sephadex G-75 í rannsóknum á merkjum við frumur
Rannsóknir á umbreytingu rauðra blóðkorna og virkni integríns
Viðloðunarviðtaka blóðflagna er algengasta glýkópróteinið á yfirborði blóðflagnahimnunnar og skiptir sköpum fyrir hemostasis og segamyndun. Rannsakaðu notkun Sephadex G-75 til að líkja eftir samspili blóðflagna og kollagen undirþels:
Integrin virkjunarlíkan: Hreinsaða integrin IIB 3 var fest á yfirborð hlaupagnir og leysanlegt fibrinogen (FG) var bætt við sem bindill. Bindandi hreyfiorka fannst með yfirborðsplasmon resonance (SPR). Í ljós kom að sækni integríns við FG eftir virkjun var verulega bætt (KD var minnkað úr μ m í nm).
Lyfjaskimun lyfja: Forspennu Integrin Fg Complex í hlaupsúlu, bættu við blóðflögu lyfjum með mismunandi styrk (svo sem Tirofiban), reiknaðu hömlunarhraða lyfja á virkni integríns með skolunar hámarks tilfærslu og veita háa - afköst skimunarpall fyrir þróun nýrra antitrombotic lyfja.
Reglugerð á merkjum sem tengjast æxli
Æxlisfrumur stuðla að útbreiðslu og meinvörpum með óeðlilegri virkjun merkjaslóða eins og MAPK og PI3K/Akt. Hægt er að nota Sephadex G-75 til að einangra og hreinsa lykilprótein í merkjaslóðum:
Rannsóknir á EGFR merkjum: EGFR prótein var hreinsað með Sephadex G-75 hlaupsíun og fosfórýlunarstaða þess var greind með massagreining. Í ljós kom að fosfórýlunarstig Y1068 og Y1086 staðanna með EGFR var marktækt aukið eftir EGF örvun, sem virkjaði ERK1/2 og AKT merki.
Greining lyfjaþolsgreiningar: Í lyfi - ónæmum maga krabbameinsfrumum (SGC7901/VCR) var UHRF1 prótein einangrað og hreinsað með Sephadex G-75, og það kom í ljós að ofþrýstingur þess getur hindrað virkjun lyfjategundar (IC ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅ ₅. sinnum).
Merki ónæmisfrumna og reglugerð um fjölsykru
Red Algae Polysaccharides (BFP) Auka ónæmissvörun með því að virkja NF - κ B og MAPK merkjaslóða í átfrumum. Rannsóknir á aðskilnaði og hreinsun BFP og íhluta þess (F1, F2, F3) með Sephadex G-75:
Polysaccharide component analysis: BFP, F1, F2 and F3 with purity>95% voru fengin með Sephadex G-75 gelsíun ásamt DEAE sellulósa 52 jónaskipti litskiljun, og mólmassa þeirra var 120 kDa, 85 kDa, 60 kDa og 45 kDa, í sömu röð.
Virkjun merkisleiða: Í RAW264.7 átfrumu líkaninu geta BFP og íhlutir þess verulega framkallað seytingu NO og TNF -, og fyrirkomulag þess felur í sér NF - κ B kjarnorkubreytingu og fosfórun JNK, ERK og P38 MAPK. Hreinsuðu íhlutirnir aðskildir með Sephadex G - 75 sýndu að F1 hafði sterkustu virkjunaráhrif á NF - κ B og MAPK ferla (eykur engin framleiðsla um 2,5 sinnum og TNF - seytingu með 3 sinnum).
maq per Qat: Sephadex G75 CAS 37224-29-6, birgjar, framleiðendur, verksmiðja, heildsölu, kaup, verð, magn, til sölu